一、 質(zhì)譜分析的原理和特點(diǎn)
質(zhì)譜分析法是在高真空系統(tǒng)中測(cè)定樣品的分子離子及碎片離子質(zhì)量，來(lái)確定樣品相對(duì)分子質(zhì)量及分子結(jié)構(gòu)的方法。化合物分子受到電子流沖擊后，形成的帶正電荷分子離子或碎片離子，按照其質(zhì)量m和電荷z的比值m/z(質(zhì)荷比)大小依次排列而被記錄下來(lái)，這種方法稱(chēng)為質(zhì)譜。
一般將樣品于高真空中，通常真空度達(dá)到10-6Torr，經(jīng)過(guò)離子源受到高速電子流或強(qiáng)電場(chǎng)等作用，失去外層電子而生成分子離子，或化學(xué)鍵斷裂生成各種碎片離子，然后將分子離子和碎片離子引入到一個(gè)強(qiáng)的正電場(chǎng)中。不同質(zhì)荷比(m/z)的離子具有不同的速度，利用離子不同質(zhì)荷比及其速度差異，質(zhì)量分析器可以將其分離，然后由檢測(cè)器檢測(cè)其信號(hào)強(qiáng)度，最后得到一張以質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)，以相對(duì)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)的質(zhì)譜圖。
質(zhì)譜分析的特點(diǎn)：
靈敏度高，樣品用量少應(yīng)用范圍廣;分析速度快，并可實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)測(cè)定;與其它儀器相比，儀器結(jié)構(gòu)復(fù)雜，價(jià)格昂貴，使用及維修比較困難。
儀器流程：
通過(guò)合適的進(jìn)樣裝置將樣品引入并進(jìn)行氣化;氣化后的樣品引入到離子源進(jìn)行電離—離子化過(guò)程;電離后的離子經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)募铀俸筮M(jìn)入質(zhì)量分析器，按不同的質(zhì)荷比(m/z)進(jìn)行分離;經(jīng)檢測(cè)器檢測(cè)、記錄后獲得質(zhì)譜圖。
二、質(zhì)譜常見(jiàn)問(wèn)題分析
1. 質(zhì)譜不出峰的可能原因?
1)進(jìn)樣系統(tǒng)與離子源沒(méi)連接或有漏液、2)六通閥漏液、3)霧化氣沒(méi)開(kāi)、4)噴霧電壓沒(méi)有、5)離子進(jìn)入分析器的離子通道堵塞、6)噴霧毛細(xì)管堵塞
2. 等度還是梯度洗脫如何選擇?
一般來(lái)說(shuō)對(duì)于組成簡(jiǎn)單的樣品可以采用等度洗脫，而對(duì)于那些復(fù)雜的樣品分離通常需要進(jìn)行梯度洗脫。
3. 氣質(zhì)和液質(zhì)有何不同?
真空系統(tǒng)和電離方式會(huì)有所不同。氣質(zhì)的真空系統(tǒng)，需要一個(gè)小的機(jī)械泵和一個(gè)分子渦輪泵。液質(zhì)的機(jī)械泵要比氣質(zhì)大，需要兩個(gè)分子渦輪泵。氣質(zhì)的電離方式有電子電離(EI)和化學(xué)電離(CI)。液質(zhì)的電離方式有電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學(xué)電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。
3. APCI和ESI的不同點(diǎn)?
1)離子產(chǎn)生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。
2)能被分析的化合物類(lèi)型不同。APCI適合弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性;ESI 極性化合物和生物大分子。
3)APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子;ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類(lèi)等生物分子。
4. 質(zhì)譜是如何定量的?
質(zhì)譜定量是以后面產(chǎn)生的碎片峰(子離子)定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產(chǎn)生的特征性碎片，所以用MRM定量靈敏度會(huì)比用SIM定量好很多。建立方法的步驟是：用一定溶度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液(1-10 ug/mL)調(diào)諧化合物的一級(jí)質(zhì)譜條件，找到母離子的最佳質(zhì)譜條件。然后對(duì)母離子進(jìn)行打碎，優(yōu)化碰撞能量，得到其特征性的子離子。最后利用該質(zhì)譜條件和該母離子、子離子對(duì)進(jìn)行定量。
5. 如何更換機(jī)械泵油?
一般6個(gè)月到一年更換一次泵油，可同時(shí)停機(jī)對(duì)儀器進(jìn)行一次清洗。更換泵油的時(shí)候，先開(kāi)啟振氣閥5-10分鐘，待將泵內(nèi)沉淀振起后，關(guān)閉振氣閥，同時(shí)關(guān)閉電源。打開(kāi)泵下的泵油排放閥門(mén)，放掉舊油。如果泵油已經(jīng)很臟，則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。
6. 質(zhì)譜基線高是什么原因?
質(zhì)譜的基線其實(shí)跟液相的紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器一樣，基線高的原因不外乎內(nèi)部和外部的原因。
1)選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應(yīng)比較高，比如水相比較多的時(shí)候，噪音比較大些;還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些。
2)檢測(cè)器的靈敏度越高的時(shí)候，噪音應(yīng)該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴(yán)重時(shí)，基線肯定比較高。比如離子阱或檢測(cè)器受到污染，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線噪音。
3)質(zhì)譜的基線很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如作選擇離子掃描的時(shí)候，基線就低些。
4)多級(jí)質(zhì)譜一般做二級(jí)或三級(jí)質(zhì)譜，基線噪音就低很多。
