一、 質(zhì)譜分析的原理和特點
質(zhì)譜分析法是在高真空系統(tǒng)中測定樣品的分子離子及碎片離子質(zhì)量，來確定樣品相對分子質(zhì)量及分子結(jié)構(gòu)的方法。化合物分子受到電子流沖擊后，形成的帶正電荷分子離子或碎片離子，按照其質(zhì)量m和電荷z的比值m/z(質(zhì)荷比)大小依次排列而被記錄下來，這種方法稱為質(zhì)譜。
一般將樣品于高真空中，通常真空度達到10-6Torr，經(jīng)過離子源受到高速電子流或強電場等作用，失去外層電子而生成分子離子，或化學鍵斷裂生成各種碎片離子，然后將分子離子和碎片離子引入到一個強的正電場中。不同質(zhì)荷比(m/z)的離子具有不同的速度，利用離子不同質(zhì)荷比及其速度差異，質(zhì)量分析器可以將其分離，然后由檢測器檢測其信號強度，最后得到一張以質(zhì)荷比為橫坐標，以相對強度為縱坐標的質(zhì)譜圖。
質(zhì)譜分析的特點：
靈敏度高，樣品用量少應(yīng)用范圍廣;分析速度快，并可實現(xiàn)多組分同時測定;與其它儀器相比，儀器結(jié)構(gòu)復雜，價格昂貴，使用及維修比較困難。
儀器流程：
通過合適的進樣裝置將樣品引入并進行氣化;氣化后的樣品引入到離子源進行電離—離子化過程;電離后的離子經(jīng)過適當?shù)募铀俸筮M入質(zhì)量分析器，按不同的質(zhì)荷比(m/z)進行分離;經(jīng)檢測器檢測、記錄后獲得質(zhì)譜圖。
二、質(zhì)譜常見問題分析
1. 質(zhì)譜不出峰的可能原因?
1)進樣系統(tǒng)與離子源沒連接或有漏液
2)六通閥漏液
3)霧化氣沒開
4)噴霧電壓沒有
5)離子進入分析器的離子通道堵塞
6)噴霧毛細管堵塞
2. 等度還是梯度洗脫如何選擇?
一般來說對于組成簡單的樣品可以采用等度洗脫，而對于那些復雜的樣品分離通常需要進行梯度洗脫。
3. 氣質(zhì)和液質(zhì)有何不同?
真空系統(tǒng)和電離方式會有所不同。氣質(zhì)的真空系統(tǒng)，需要一個小的機械泵和一個分子渦輪泵。液質(zhì)的機械泵要比氣質(zhì)大，需要兩個分子渦輪泵。氣質(zhì)的電離方式有電子電離(EI)和化學電離(CI)。液質(zhì)的電離方式有電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。
3. APCI和ESI的不同點?
1)離子產(chǎn)生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。
2)能被分析的化合物類型不同。APCI適合弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性;ESI 極性化合物和生物大分子。
3)APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子;ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。
4. 質(zhì)譜是如何定量的?
質(zhì)譜定量是以后面產(chǎn)生的碎片峰(子離子)定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產(chǎn)生的特征性碎片，所以用MRM定量靈敏度會比用SIM定量好很多。建立方法的步驟是：用一定溶度的標準品溶液(1-10 ug/mL)調(diào)諧化合物的一級質(zhì)譜條件，找到母離子的最佳質(zhì)譜條件。然后對母離子進行打碎，優(yōu)化碰撞能量，得到其特征性的子離子。最后利用該質(zhì)譜條件和該母離子、子離子對進行定量。
5. 如何更換機械泵油?
一般6個月到一年更換一次泵油，可同時停機對儀器進行一次清洗。更換泵油的時候，先開啟振氣閥5-10分鐘，待將泵內(nèi)沉淀振起后，關(guān)閉振氣閥，同時關(guān)閉電源。打開泵下的泵油排放閥門，放掉舊油。如果泵油已經(jīng)很臟，則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。
6. 質(zhì)譜基線高是什么原因?
質(zhì)譜的基線其實跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣，基線高的原因不外乎內(nèi)部和外部的原因。
1)選擇的流動相在質(zhì)譜的響應(yīng)比較高，比如水相比較多的時候，噪音比較大些;還有如果鹽含量比較大的時候，噪音更大些。
2)檢測器的靈敏度越高的時候，噪音應(yīng)該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴重時，基線肯定比較高。比如離子阱或檢測器受到污染，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線噪音。
3)質(zhì)譜的基線很多時候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如作選擇離子掃描的時候，基線就低些。
4)多級質(zhì)譜一般做二級或三級質(zhì)譜，基線噪音就低很多。
